Анотація
Резюме. Целью нашего исследования было определение эффективности применения культивируемых суставных хондроцитов (ХЦ) в агарозном гидрогеле (ранние сроки наблюдения, 3 мес.) в возобновлении смоделированных костно-хрящевых дефектов критического размера коленного сустава у крупных животных.
Материалы и методы. В экспериментальную серию входили 4 собаки (правая задняя конечность), у которых создавали дефект суставного хряща глубже субхондральной кости в зоне межмыщелковой борозды бедренной кости диаметром 3 мм и 5 мм в глубину и которым вторым этапом в травмированный сустав интраартикулярно проводили имплантацию (пломбирование) агарозного геля с культивируемыми ХЦ. В контрольную серию входили 4 собаки (левая задняя конечность), которым в дефект зоны межмыщелковой борозды бедренной кости не имплантировали гель с клетками. Агарозный гидрогель с культивируемыми аллогенными ХЦ толщиной 5 мм и диаметром 3 мм имплантировали по типу аппликации в дефекты суставных поверхностей после кюретажа дна и стенок костно-хрящевых дефектов суставных поверхностей. Клеточные препараты и культуры микроскопировались при 40, 100-, 200 и 320-кратном увеличении. Гистологические срезы толщиной 10-15 мкм, сделанные на криотоме, закрашивали гематоксилин-эозином и гематоксилин-пикрофуксином по ван Гизону.
Результаты. Оптимизирована методика ферментативной изоляции ХЦ суставного хряща собаки. Показана удовлетворительная эффективность применения культивированных аллогенных суставных ХЦ в агарозном гидрогеле (ранние сроки наблюдения) в лечении смоделированных костно-хрящевых дефектов критического размера у крупных животных в пределах запланированных сроков наблюдения.
Выводы. В проведенном экспериментальном исследовании определена эффективность применения культивированных аллогенных суставных хондроцитов в агарозном гидрогеле (ранние сроки наблюдения) в возобновлении смоделированных костно-хрящевых дефектов критического размера коленного сустава у собак в пределах запланированных сроков наблюдения. Через 3 мес. в группе экспериментальных животных выявлены признаки образования регенерата, который характеризовался незрелостью, наличием смеси фиброзной соединительной ткани и фиброзного хряща с ячейками хондроида.
Посилання
Brittberg M, Lindahl A, Nilsson A, Ohlsson C, Isaksson O, Peterson L. Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation N. Engl. J. Med. 1994;331(14):889-895. DOI: 10.1056/NEJM199410063311401.
Brittberg M. Gersoff W. Cartilage surgery: an operative manual. Elsevier Saunders; 2011. 320 p.
Deev RV. Market analysis of cell preparations for the correction of skeletal tissue pathology. Klet. transpl. i tkan. inzhener. 2006;2(4):78-83. [in Russian].
Wakitani S, Goto T, Pineda SJ, Young RG, Mansour JM, Caplan AI, et al. Mesenchymal cell-based repair of large, full-thickness defects of articular artilage J. Bone Joint Surg. Am. 1994;76(4):579-592. DOI: 10.2106/00004623-199404000-00013.
Wakitani S, Imoto K, Yamamoto T, Saito M, Murata N, Yoneda M, et al. Human autologous culture expanded bone marrow mesenchymal cell transplantation for repair of cartilage defects in osteoarthritic knees. Osteoarthritis Cartilage. 2002;10(3):199-206. DOI: 10.1053/joca.2001.0504.
Quantavalla J, Uzeil-Fusi S, Yin J. Boehnlein E, Pastor G, Blancuzzi V, et al. Fluorescently labeled mesenchymal stem cells (MSCs) maintain multilineage potential and can be detected following implantation into articular cartilage defects Biomaterials. 2002;23(1):109-19. DOI: 10.1016/S0142-9612(01)00086-2.
Prockop DJ, Phinney DG, Bunnell BA. Mesenchymal stem cells: methods and protocols. Totowa, NJ: Humana Press; 2008. 192 p.
Freshni Ya. Animal cell culture: a practical guide. Per. 5-go angl. izd. M.: BINOM. Laboratoriya znaniy; 2010. 691 s. [in Russian].
Hurtig MB, Buschmann MD, Fortier LA, Hoemann CD, Hunziker EB, Jurvelin JS, et al. Preclinical studies for cartilage repair: Recommendations from the International Cartilage Repair Society (ICRS Recommendation Papers). Cartilage. 2011;2(2):137-152. DOI: 10.1177%2F1947603511401905.
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.